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液相色谱仪的正确使用及维护说明

时间:2015-03-18??编辑:www146net仪器字体:
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通过一下几个方面对液相色谱仪器使用及维护进行说明
液相色谱仪是测量仪器中的一种利用混合物在液固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,后分析鉴定的仪器。液相色谱仪对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。液相色谱仪是一种高精密仪器,在日常使用中应注意仪器的维护保养工作。下面,小编就液相色谱仪的日常维护保养工作做一个简单的先容。  
贮液瓶的日常维护   
清洁是保持流动相贮液瓶正常使用的关键,使用LCMS级的溶剂和试剂。陈旧的流动相和用久了的试剂应定期废弃,防止生长微生物和组分改变。贮液瓶内壁定期清洗,流动相滤头定期清洗或更换。   
液相泵的日常维护   泵的密封圈是最易磨损的部件,密封圈的损坏可能引发漏液或剧烈压力波动;单向阀的正常工作至关重要,它若发生故障,将直接影响流速的稳定性。   日常维护应注意以下几点:   
①使用LCMS级的溶剂和试剂;  
②确保系统压力在正常范围;  
③使用完缓冲液体系后用纯水冲洗干净,防止盐沉积,系统不运行时应存储在无缓冲液的溶液或有机溶剂中;
④密封圈按照各个生产厂商的建议定期更换。
进样器的日常维护   
样品预处理对于防止进样针和进样阀堵塞至关重要。   
预处理常用方法:  
①超滤;  
②溶剂萃取/去盐;  
③固相萃取;   
④灌注净化/去盐;  
⑤色谱分离;   
⑥甲醇或乙腈沉淀蛋白;   
液相色谱仪⑦酸水解,酶解;   
⑧衍生化。   
进样阀的维护:   
①进样时,进样针应插到底。   
②不使用时将针头留在进样器内。   
③进样时应使用液相色谱专用平头进样针。
④常用密封垫的材质适用于样品溶液pH<10,否则换特氟隆材质的密封垫pH10-13。   
⑤清洗应使用专用针口清洗器。   
⑥每天分析工作结束后,要用样品溶液相似溶剂清洗进样阀中残留的样品。   
色谱柱的维护和保存   
①每次工作结束,用高比例强溶剂冲洗色谱柱,冲去留在柱上的强吸附组分;   
②净化样品,样品中的微粒会进入色谱柱,在柱头上沉积下来,造成柱压升高,柱效降低;   
③避免撞击色谱柱,如掉落或超声震荡;   
④柱压避免急剧变化;   
⑤反相柱C18应保存在纯有机相或50%有机相中,一周不用要卸下,两端用堵头密封,避免干枯。   
流动相的选择  
 LCMS常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液,如甲酸铵、乙酸铵等,还可以加入易挥发酸碱如甲酸、乙酸或氨水等调节pH值;LCMS体系要避免使用含磷或氯的缓冲液,含钠和钾的成分必须<1mmol/l。(盐分太高会抑制离子源的信号和堵塞喷雾针及污染接口)含甲酸(或乙酸)<2%,含三氟乙酸<0.5%,含三乙胺<1%,含醋酸铵<10—5 mmol/l。   样品的预处理   从保护仪器角度出发,防止固体小颗粒堵塞进样管道和喷雾针,防止污染MS,降低分析背景,排除对分析结果的干扰;从ESI电离得过程分析看,电荷聚集在液滴的表面,样品和杂质在液滴表面相互竞争,不挥发物(如磷酸盐等)妨碍带电液滴挥发,大量杂质妨碍带电样品离子气化,增加电荷中和的可能。
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